1. (2024高三上·廣東模擬) 聚羥基脂肪酸酯（PHA）是一種可降解的生物大分子，常用來(lái)制備環(huán)保塑料包裝袋，研究人員通過(guò)構(gòu)建受溫度控制的大腸桿菌表達(dá)體系來(lái)生產(chǎn)PHA。為實(shí)現(xiàn)通過(guò)溫度控制工程菌合成所需的蛋白質(zhì)，科研人員利用下圖方案，構(gòu)建了相關(guān)的基因表達(dá)載體，然后將其導(dǎo)入大腸桿菌，獲得相應(yīng)的工程菌。

   

1. （1） 圖1所示的基因表達(dá)載體中，RFP基因和GFP基因?qū)儆?span id="bpkxhdj" class="filling" >；啟動(dòng)子M和啟動(dòng)子R的類型雖然不同，但是二者都能與結(jié)合，啟動(dòng)基因的轉(zhuǎn)錄。
3. （2） 大腸桿菌在30℃和37℃均可生長(zhǎng)和繁殖，據(jù)圖1分析，當(dāng)培養(yǎng)溫度為30℃時(shí)，C基因編碼的C蛋白形成二聚體，因而大腸桿菌表達(dá)熒光蛋白。
5. （3） PHA的合成過(guò)程中，可由單體分子3HB和4HB隨機(jī)聚合形成隨機(jī)共聚物；也可以先合成3HB聚合體，再合成4HB聚合體，最后形成分段共聚物（如圖2所示），其中分段共聚物形式的pHA品質(zhì)更佳。請(qǐng)完善以下表格，通過(guò)改造上述方案以實(shí)現(xiàn)應(yīng)用工程菌大規(guī)模生產(chǎn)優(yōu)質(zhì)PHA（不考慮各種酶在不同溫度下的活性差異）。

   操作	目的
   對(duì)上述方案表達(dá)載體的改造為：①，并加入持續(xù)表達(dá)啟動(dòng)子連接的②基因。將構(gòu)建好的表達(dá)載體導(dǎo)入大腸桿菌，獲得工程菌。	獲得可以合成PHA的工程菌。
   以③為原料配置培養(yǎng)基，滅菌后加入上述工程菌。	配制培養(yǎng)基、接種。
   控制發(fā)酵條件：30℃發(fā)酵12小時(shí)，隨后切換至37℃發(fā)酵36小時(shí)。	發(fā)酵48小時(shí)，獲得3HB 比例為④的分段共聚物。